大鼠脊髓損傷模型

該模型采用了CRISPR/Cas9技術，創新性地結合了人類遺傳學與動物基因編輯技術，首次在小鼠上重構了與人類疾病類似的遺傳模式，在Tbx6基因上同時引入無效突變和promotor區域的亞效等位基因，并將二者結合，形成復合雜合突變并獲得相應的脊柱畸形表型。該模型是國際上首創的復合雜合突變脊柱畸形表型，對于解釋先天性脊柱側凸的分子機制和發病過程具有極高的研究討論價值。

該基因編輯小鼠將在屏障隔離環境（北京協和醫院實驗動物中心）內進行繁育、飼養及相關實驗，其監督管理措施由動物中心負責。屏障隔離期間將保持清潔，保證其具有SPF級別清潔度，減少感染及發病幾率。嚴格實驗室管理，防止小鼠外泄，實驗設計時將禁止其與野生型小鼠交配，保證編輯基因組序列不向自然界流通。上述措施將保證該動物模型的生物安全性，避免其影響生態環境。

1. 生物學特征

手術組與假手術組相比，排尿受限，體型消瘦。

2. 臨床表現

手術時可見大鼠尾部擺動，大鼠術后蘇醒，雙下肢癱瘓。

3. 發病過程

手術后即發病。

4. 臨床診斷

BBB（大鼠脊髓損傷）評分標準：將大鼠后肢運動分為22個等級，完全癱瘓為分，完全正常為21分，兩者之間根據功能恢復程度分別定為1-20分。

（一）實驗動物及材料:

1. 8周齡SD大鼠，雌性；

2. 常規手術器械、顯微鏡、臺燈；

3. 抗生素、2%戊巴比妥鈉、碘伏、75%乙醇。

（二）制作方法

1. 大鼠麻醉后，固定，備皮，碘伏擦拭，分離皮膚、皮下組織，沿肌肉走向分離脊椎旁肌肉；

2. 確定T8-T10椎體位置，用鑷子略加起T9椎體上端，用鉗字去除椎體和椎板，暴露T9段脊髓；

3. 在顯微鏡和光源下用顯微剪去除T9-T10段脊髓；

4. 壓迫止血，用生理鹽水沖洗創面，縫合肌肉和皮膚；

5. 術后每天給予抗生素，以防感染。

1.物種：大鼠

2.品系：SD

3.人類疾病：脊髓損傷

4.傳染性：無

5.微生物：無

6.類別：疾病模型