心肌缺血再灌注大鼠模型

動物癥狀觀察：

表現為體重減輕、弓背豎毛，在回輸后的一個月后死亡。

1.術中心電圖：如結扎成功，心電圖將會出現ST段抬高。

2.再灌注28天彩超

假手術組心室大小正常，前壁運動良好，手術組心室明顯擴大，前壁幾乎無運動。

3.再灌注24小時心肌梗死面積

4.再灌注28天masson染色

1.SD大鼠 ，名稱：SS/JrHsdMcwiCrlVr，近交系（Inbred Rat）

品系來源 ：動物來源：由美國的Sprague & Dawley農場的R.W.Dawley用雜合的雄性大鼠和Wistar雌性大鼠雜交后育成的一個白化封閉群大鼠，1950年傳入美國的癌癥研究所（CRL），1955年進行生物凈化，1964年傳入美國各地，同時傳入法國。1992年自美國NIH引入到中科院上海實驗動物中心。 動物外部特征：白化 遺傳基本組成：遠交群大鼠 種群數：核心群35對，增殖群100對 特點：生長快，繁育性能好，大多用于安全性試驗及營養與生長發育有關的研究。該品系對性激素敏感，對呼吸道疾病有較強的抵抗力。

2.心肌缺血/再灌注損傷大對照鼠SS-13BN Rat，名稱：SS-Chr13BN/McwiCrlVr，

?同類系（Consomic Rat）

3.誘導方法

1）大鼠稱重后，使用2%戊巴比妥（用生理鹽水配置），按0.3ml/100g體重經腹腔麻醉。根據大鼠四肢肌張力確定麻醉良好后，仰位固定大鼠于手術臺上，頸前區及心前區剃毛。

2）頸前區消毒，剪開頸部正中皮膚，分離組織，沿氣管方向進行氣管插管，氣管導管接呼吸機，參數設置：潮氣量 2ml/100g體重，頻率55-60次/min，吸呼比 1：1。

3）心前區消毒，于胸骨左緣第四肋水平剪開長約2cm的水平切口，鈍性分離皮膚與肌肉，于胸骨左緣第 4 肋間隙開胸，剝開心包，暴露心臟，在肺動脈圓錐與左心耳之間，隱約可見心肌層下面細小、透亮、粉紅左主冠狀動脈前降支。

4）無創小圓針5-0絲線在左心耳下緣前降支左側進針，進針深度控制在 1mm，寬度為3mm 左右，器械打一活結，造成暫時心肌缺血，45min 后松開絲線恢復冠脈血流。假手術組左主冠狀動脈僅穿線不結扎。

5）通過肉眼觀察結扎前后左室前壁的局部顏色變化，判斷模型是否成功。結扎成功時，可見受累左室局部瞬間蒼白，隨即發紺、腫脹以及收縮力下降，成功再灌注時數秒內左室局部迅速充血，缺血心肌顏色由暗紅變為鮮紅。

6）依次縫合關閉肋間隙，肌肉，以及皮膚，酒精消毒皮膚。觀察大鼠直至蘇醒。

近年來隨著動脈搭橋術、溶栓療法、經皮腔內冠脈血管形成術、心臟外科體外循環等方法的推廣應用，使心肌梗死后重新得到血液再灌注。多數情況下，缺血后再灌注可以使心肌功能恢復，但有時不僅不能改善心肌功能，反而加重心肌細胞的損傷，即心肌缺血再灌注損傷（myocardial ischemia reperfusion injury，MIRI）。然而心肌梗死最主要的治法仍是血管再通、恢復心肌細胞的血流供應，如何預防缺血再灌注的損傷仍是目前待解決的問題。

MIRI的發病機制尚未徹底闡明，目前認為自由基的作用、細胞內鈣超載及白細胞的激活是缺血再灌注損傷的重要發病環節。[1]當組織細胞缺血缺氧時OFR清除系統功能降低或喪失，而生成氧自由基的系統活性卻增強，一旦恢復組織血液供應和供氧，OFR便會出現大量且急劇的堆積，其會以不同方式造成細胞急性或慢性損傷。[2]細胞內鈣超載引起的損傷機制與以下幾點有關①大量鈣離子涌入細胞，觸發線粒體、肌漿網攝取鈣離子，從而消耗大量ATP，同時鈣離子形成不溶性的磷酸鈣，抑制線粒體ATP合成，加重細胞能量代謝障礙，[3] ②胞內鈣離子增多，則鈣依賴性蛋白酶活性增強，后者使黃嘌呤脫氫酶轉化為黃嘌呤氧化酶，從而增加氧自由基生成。③胞內鈣離子升高，可激活某些ATP酶，從而水解細胞高能磷酸鹽，產生大量的氫離子加重細胞內酸中毒。④鈣離子增多還能激活磷脂酶類，使膜磷脂降解，導致細胞膜及細胞器膜受損。 [4] 白細胞尤其是中性粒細胞在缺血組織聚集浸潤，對心肌缺血及再灌注損傷的發生及嚴重程度起到了重要作用[5,6]激活的中性粒細胞及血管內皮細胞釋放大量的致炎物質，如自由基、蛋白酶、溶酶體等，不但改變了自身結構和功能，而且造成周圍組織細胞損傷。