炎癥誘導小鼠腸癌模型

AOM誘導腸上皮粘膜產生損傷，DSS誘導炎癥，二者聯合使用使腸道黏膜上皮處于持續的損傷與修復病程，誘導腫瘤發生。AOM/DSS誘導3 ~ 4周后，小鼠結腸黏膜出現彌散性炎癥，上皮隱窩異常，固有層呈現不規則形態并有大量炎癥細胞表達（淋巴細胞，漿細胞）。DSS誘導三個循環后在小鼠結直腸部位看到多個腺瘤，部分腺瘤會發生癌變轉移。

該小動物模型飼養在清潔級動物中，微生物處于監控狀態，動物房有相應的保護措施，小鼠不會出現逃逸，不會對外界環境造成影響。

氧化偶氮甲烷（AOM）經肝乙醇誘導型細胞色素p450亞型（CYP2E1）催化發生羥基化反應生成活性代謝物甲基氧化偶氮甲醇(methylazomethanol, MAM)，隨后MAM與葡萄糖醛酸和（或）硫酸鹽或谷胱甘肽結合，通過膽汁或血液系統進入腸道，在腸道中被腸道菌群水解酶分解為游離化合物，后經結腸組織酶或細菌和結腸組織激活系統作用，MAM自發分解為甲基碳正離子從而使DNA烷基化。AOM與DSS聯合使用后小鼠逐漸出現腹瀉、黏液血便、體質量減輕、毛色干枯、肛門脫垂等表現。遠端大腸上皮異常增生和腺瘤形成（Adenoma）。

BALB／cA-nu BALB/cA-nu小鼠，胸腺缺失，為第11對染色體隱性遺傳，T細胞免疫缺陷，B細胞正常，具有較高的NK細胞活力，無接觸敏感性，無移植排斥反應。

制作穩定高表達GFP的細胞，在熒光顯微鏡下呈強熒光，并且熒光均勻分布于整個細胞內。單克隆GFP細胞在無G418篩選壓力下，傳代數次后仍能穩定高水平表達GFP（圖1）。細胞形態和未轉染細胞無明顯區別。

圖1綠色熒光標記的BGC823細胞系

模型制作采用BALB／cA-nu裸小鼠，鼠齡6周，體重16—20 g。BALB／cA-nu裸小鼠在實驗室無特定病原體飼養間飼養。收集處于生長對數期的MGC803-eGFP腫瘤細胞，稀釋至5×106cells／mL。取200μL細胞懸液進行皮下注射接種。

按照10-15mg/kg體重單次腹腔注射AOM，然后給予2.5%DSS飲水5天，16天正常飲水，共三個循環。