應(yīng)該是沒有,檢測(cè)細(xì)菌都要做培育檢測(cè),而且還不是一切細(xì)菌都能檢測(cè)出來。細(xì)菌是個(gè)大家族。
有沒有一種簡易的方法可以檢測(cè)普通病毒細(xì)菌的多少?比如試紙的方式?病毒學(xué)檢驗(yàn)重點(diǎn)?健明迪檢測(cè)
我國主要的幾種檢測(cè)試劑盒都是基于RT-PCR原理。由于需求檢測(cè)的病毒樣本濃度有高有低,高的容易檢測(cè),低濃度就會(huì)漏掉。所以PCR的方法就把病毒基因擴(kuò)增很多倍,到達(dá)可以檢測(cè)出來的濃度。基本操作如下: 01 搜集咽拭子等病毒樣本,經(jīng)過試劑打碎維護(hù)病毒的蛋白質(zhì)殼子,萃取病毒RNA。一方面是萃取,另一反面,打碎之后就沒有了感染性,相對(duì)平安一些。
02 由于這次新冠肺炎是單鏈RNA病毒,所以要先轉(zhuǎn)換成cDNA。這個(gè)可以類比像是視頻文件,mp4,rmvb,avi這些都是罕見格式,同一個(gè)視頻不同格式,意思都一樣,可以相互轉(zhuǎn)換。
03 慣例PCR反響,加熱到94℃把DNA拉鏈拉開,之后再55℃-60℃讓引物,就是拉鏈扣區(qū)分套在兩條拉鏈上,再升溫到72℃讓拉鏈自己復(fù)制,用左拉鏈做模板造一個(gè)右拉鏈,用右拉鏈做模板造一個(gè)左拉鏈。這樣折騰一次為一個(gè)循環(huán),RNA數(shù)量翻一倍。之后再折騰25-30次。這樣就算很大批的病毒這個(gè)時(shí)分也顯現(xiàn)出來了。
PCR操作方法 這個(gè)方法很主流,也很經(jīng)典。但是這個(gè)操作步驟太多,而且每次都是微量,手一抖就完蛋了。另外引物(就是拉鏈扣)的質(zhì)量也是關(guān)鍵,假設(shè)復(fù)制錯(cuò)了拉鏈,那么整個(gè)檢測(cè)前功盡棄。 當(dāng)然還無機(jī)器清洗的效果,假設(shè)上一個(gè)陽性樣本檢測(cè)之后,沒有洗潔凈設(shè)備,下一個(gè)原本陰性患者能夠就會(huì)假陽性被誤診。中國大三甲醫(yī)院自己都有PCR檢測(cè)和人員,流程比擬熟練。美國歐洲很多醫(yī)院偏專科,綜合性超大型少一些,原本很多檢驗(yàn)都是委托外包第三方實(shí)驗(yàn)室。遇到疫情,著急出結(jié)果自己上手,能夠有手法不熟練的狀況。假設(shè)又正好運(yùn)用了某些中國的無證試劑盒廠商出品的無證試劑,多重誤差疊加,準(zhǔn)確度就會(huì)崩盤。 那么雅培檢測(cè)試劑盒和國際主流試劑盒有啥不一樣呢? 這次雅培的五分鐘檢測(cè)試劑盒用的是一個(gè)完全不同的反響體系,簡稱RPA(重組酶聚合酶擴(kuò)增),也叫做恒溫?cái)U(kuò)增技術(shù)。中心就是用三個(gè)主要原料:單鏈核酸重組酶、單鏈DNA結(jié)合蛋白(SSB)和鏈置換DNA聚合酶,在一個(gè)恒定溫度下37度到42度都可以,直接把DNA套成一個(gè)環(huán),在本地施任務(wù)業(yè),直接套用引物,復(fù)制目的DNA。 RPA技術(shù)優(yōu)勢(shì)很清楚: 01 特別快,傳統(tǒng)PCR要45分鐘,由于要重復(fù)升溫降溫。RPA由于是恒溫,所以只需求3-10分鐘。
02 靈敏度高,由于是高度定向擴(kuò)增,所以樣品即使有點(diǎn)兒雜質(zhì)也OK,免除了前處置環(huán)節(jié),盡量多的保管了樣本。
03 溫度控制要求低,普通是加熱到40℃,但是在緊急狀況下,貼在人身上用人體的體溫36℃、37℃也沒效果。甚至在室溫25℃,也是可以運(yùn)轉(zhuǎn),就是慢點(diǎn)兒,要等一個(gè)小時(shí)而已。
04 適用性強(qiáng),面對(duì)RNA病毒,直接在試劑里參與逆轉(zhuǎn)錄酶就好,一鍋端。
益處是很多,但是畢竟RPA也只能設(shè)計(jì)兩個(gè)引物,假設(shè)設(shè)計(jì)不好,能夠就會(huì)錯(cuò)誤的把其他病毒錯(cuò)檢成新冠。但是雅培果真行業(yè)大佬,設(shè)計(jì)巧奪天工,對(duì)照實(shí)驗(yàn)中基本面對(duì)少量其他病毒,都沒有發(fā)生錯(cuò)誤。
反過去,RPA由于太靈敏,之前的樣本有一點(diǎn)兒殘留在機(jī)器里,下一個(gè)樣本就不準(zhǔn)了。所以雅培的設(shè)計(jì)是徹底的全封鎖一次性試劑盒。機(jī)器和樣本不直接接觸,只要激光掃碼這一塊。一切的試劑盒全部都是一次性運(yùn)用,并且外部封鎖樣本處置。這樣就防止了樣品交叉污染,由此可以釋放檢測(cè)才干,縱情地檢測(cè)更低濃度的病毒。因此可以釋放檢測(cè)才干,縱情去檢測(cè)低濃度病毒。
好東西值得吹噓。畢竟一次只能檢測(cè)一個(gè),關(guān)于窮人和偏遠(yuǎn)地域是OK。但是關(guān)于大規(guī)模檢測(cè)的中央,比如說美國方艙醫(yī)院,PCR方案短期內(nèi)還是沒法被替代。 引文: 1, Abbott RealTime SARS-CoV-2 For use under an Emergency Use Authorization (EUA) Only http://www.fda.gov/media/136258/download 2,ID NOW? http://www.alere.com/en/home/product-details/id-now.html 3,重組酶聚合酶擴(kuò)增技術(shù)研討停頓 http://html.rhhz.net/SWJSTB/html/2016-6-47.htm 靠譜的安康醫(yī)療科普節(jié)目
有沒有一種簡易的方法可以檢測(cè)普通病毒細(xì)菌的多少?比如試紙的方式?病毒學(xué)檢驗(yàn)重點(diǎn)?健明迪檢測(cè)
生物專業(yè)研討生表示往常實(shí)驗(yàn)里ct值大于35的樣品會(huì)被當(dāng)做污染丟棄掉的,之前的規(guī)范是ct值40以下就全做陽性,但是實(shí)踐上只是為了寧可錯(cuò)殺不可放過,隔離了太多的“無癥狀”,而這些“無癥狀”實(shí)踐上能夠并沒有被感染,只是沾上了一些沒有傳染才干的病毒片段,被過于嚴(yán)苛的檢測(cè)規(guī)范檢測(cè)出來。這次把規(guī)范降低到正常水平可以少隔離一些“無癥狀”,有助于緩解醫(yī)療機(jī)構(gòu)壓力
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