化妝品功效評(píng)價(jià)方法之皮膚生理學(xué)檢測(cè)?化妝品功效性評(píng)價(jià)代理公司

皮膚生理學(xué)檢測(cè)（Cutaneous Biological Test，CBT）是一種皮膚精細(xì)生理目的檢測(cè)體系，即采用皮膚膠帶粘貼（Tape Stripping）的方法采樣，經(jīng)過(guò)顯微鏡觀察、成分剖析、免疫學(xué)檢測(cè)、多組學(xué)技術(shù)，從皮膚表觀生理學(xué)到組織、細(xì)胞再到蛋白、基因水平對(duì)膠帶上采集的皮膚樣本停止多角度、多層面的原位測(cè)定，依據(jù)相應(yīng)皮膚生理學(xué)目的的變化，深化開(kāi)掘肌膚效果的成因和機(jī)制，為迷信研討皮膚以及化裝品的成效評(píng)價(jià)提供集體化、精準(zhǔn)和片面的人體皮膚大數(shù)據(jù)支持。

一、角質(zhì)層檢測(cè)

角質(zhì)層是表皮的*外層，由5-15層細(xì)胞核和細(xì)胞器消逝的角質(zhì)細(xì)胞及細(xì)胞間脂質(zhì)構(gòu)成。20世紀(jì)70年代，Peter Elias教授籠統(tǒng)的將角質(zhì)層的結(jié)構(gòu)稱之為“磚墻結(jié)構(gòu)”。

圖1 角質(zhì)層磚墻結(jié)構(gòu)

角質(zhì)層采樣是用涂有黏性資料的膠帶、圓盤或許玻片粘貼皮膚，作用于表皮角質(zhì)層的黏附力可使鱗屑零落，從而觀察角質(zhì)層的生理和病理學(xué)變化。可經(jīng)過(guò)觀察角質(zhì)鱗屑和角質(zhì)細(xì)胞的形狀來(lái)剖析皮膚的枯燥或受損狀況。

二、脂質(zhì)檢測(cè)

角質(zhì)層細(xì)胞間脂質(zhì)由大約50%神經(jīng)酰胺、25%膽固醇、15%游離脂肪酸和一些主要的脂質(zhì)組成。研討證明，皮膚脂質(zhì)的分泌進(jìn)程及主要組成成分如甘油三酯、角鯊烯、神經(jīng)酰胺、膽固醇、游離脂肪酸等的結(jié)構(gòu)、含量或比例的變化，都會(huì)影響皮膚屏障功用。

目前提取皮膚外表脂質(zhì)*常用的方法是脂帶法，比擬常用的膠帶是Corneofix?。將膠帶采集的脂質(zhì)溶解于一定比例的環(huán)己烷/乙醇溶液中，脂質(zhì)提取物在氮?dú)鈼l件下枯燥，經(jīng)過(guò)自動(dòng)化高能色譜剖析儀和氣相色譜儀定量剖析角質(zhì)層脂質(zhì)的詳細(xì)成分。可經(jīng)過(guò)火析各脂質(zhì)成分的比例來(lái)研討皮膚屏障受損或恢復(fù)狀況。

三、微生物檢測(cè)

皮膚外表?xiàng)又姸辔⑸铮?b>細(xì)菌、真菌、病毒、衣原體和某些原蟲(chóng)等，這些共同構(gòu)成了皮膚的微生物群（分為常駐菌群與暫住菌群），外部環(huán)境、皮膚微生物群以及宿主皮膚構(gòu)成了皮膚微生態(tài)。

常駐菌群是指臨時(shí)定居在皮膚，并且可以自我恢復(fù)的菌群，菌群數(shù)量和種類因集體、環(huán)境的不同而不同，它們屬于人類的共生體，可以協(xié)助皮膚抵抗外界撫慰，是皮膚菌群的主要成員，常駐菌一旦脫離特定的環(huán)境，就會(huì)形成皮膚疾病。常駐細(xì)菌主要有葡萄球菌、微球菌、丙酸桿菌、棒狀桿菌、不動(dòng)桿菌，常駐真菌有念珠菌、球擬酵母菌、表皮癬菌、小孢子菌、毛癬菌等。

暫駐菌是指經(jīng)過(guò)接觸外界環(huán)境而取得的一類微生物，包括金黃色葡萄球菌、溶血鏈球菌及腸球菌等，它們是惹起皮膚感染的主要病原菌。

確定皮膚中存在何種細(xì)菌的傳統(tǒng)方法是運(yùn)用拭子取樣。采樣技術(shù)的關(guān)鍵：運(yùn)用濕潤(rùn)的棉簽，施加動(dòng)搖的壓力，以及摩擦的分歧性（在采樣區(qū)域30 s內(nèi)來(lái)回擦拭50次）。經(jīng)過(guò)研討皮膚外表菌群的變化，可以了解微生物與皮膚效果的關(guān)系，并針對(duì)性治療。例如痤瘡丙酸桿菌可將甘油三酯水解為游離脂肪酸，這些游離脂肪酸被氧化構(gòu)成過(guò)氧化脂質(zhì)激活角質(zhì)構(gòu)成細(xì)胞的脂氧合酶，使IL-6等炎癥因子分泌添加，促發(fā)并減輕炎癥反響。

四、功用組檢測(cè)

在對(duì)功用組皮膚目的停止檢測(cè)時(shí)大多運(yùn)用D-Squame?粘貼盤停止采樣，采樣后對(duì)膠帶直接停止染色，經(jīng)過(guò)圖像剖析停止物質(zhì)定量，或采用高效液相色譜法檢測(cè)膠帶上相應(yīng)物質(zhì)的含量。功用組皮膚目的：丙二醛、維生素E、自然保濕因子、黑素細(xì)胞等。

D-Squame

參考資料：

[1] 馬雪. 化裝品成效評(píng)價(jià)（Ⅻ）-皮膚生理學(xué)檢測(cè)在化裝品成效評(píng)價(jià)中的運(yùn)用. 日用化學(xué)工業(yè). 2020.

[2] 董銀卯. 皮膚表觀生理學(xué). 化學(xué)工業(yè)出版社.

[3] 崔樂(lè). 維持皮膚屏障研討停頓—脂質(zhì)的分泌及組成. 中國(guó)皮膚性病學(xué)雜志. 2016.

[4] 王茜. 皮膚微生態(tài)與化裝品研發(fā). 日用化學(xué)工業(yè). 2017.

敏理性皮膚（Sensitive Skin，SS）特指皮膚在生理或病理?xiàng)l件下發(fā)作的一種高反響形狀，主要發(fā)作于面部，臨床表現(xiàn)為遭到物理、化學(xué)、肉體等要素?fù)嵛繒r(shí)皮膚易出現(xiàn)灼熱、刺痛、瘙癢及緊繃感等客觀癥狀，伴或不伴紅斑、鱗屑、毛細(xì)血管擴(kuò)張等客觀體征。

一、體外實(shí)驗(yàn)

1、透明質(zhì)酸酶抑制實(shí)驗(yàn)

透明質(zhì)酸酶（HAase）是透明質(zhì)酸（HA）的特異性裂解酶，抑制HAase的活性可保證HA含量和功用正常。透明質(zhì)酸酶抑制實(shí)驗(yàn)是*典型的抗敏活性評(píng)價(jià)體外方法，以透明質(zhì)酸酶抑制率為目的評(píng)價(jià)物質(zhì)的抗過(guò)敏活性，透明質(zhì)酸酶抑制率越大則抗過(guò)敏活性越強(qiáng)。

2、自在基肅清實(shí)驗(yàn)

線粒體在電子傳遞的進(jìn)程中發(fā)生的自在基會(huì)攻擊細(xì)胞膜、蛋白質(zhì)甚至DNA，招致細(xì)胞的衰老甚至死亡，抑制自在基活性可以有效緩解由外界撫慰發(fā)生的過(guò)量自在基所招致的細(xì)胞結(jié)構(gòu)功用退步，進(jìn)而維護(hù)皮膚的正常屏障結(jié)構(gòu)。自在基包括：DPPH·、羥基自在基（·OH）、超氧陰離子自在基、一氧化氮自在基（NO·）等。

3、紅細(xì)胞溶血實(shí)驗(yàn)

紅細(xì)胞溶血實(shí)驗(yàn)（RBC hemolysis test system）由歐洲替代方法驗(yàn)證中心（ECVAM）樹(shù)立，*后用于替代Draize兔眼實(shí)驗(yàn)對(duì)化合物眼撫慰性的標(biāo)識(shí)、篩查或機(jī)制研討，其原理在于測(cè)定從紅細(xì)胞中漏出的血紅蛋白的量來(lái)評(píng)價(jià)細(xì)胞膜的損傷水平，血紅蛋白漏出量越多，損傷越大。

此外，還可以經(jīng)過(guò)研討神經(jīng)酰胺、AQP-3（水通道蛋白-3）、FLG（絲聚蛋白）、Caspase-14（半胱氨酸天冬氨酸特異性蛋白酶-14）、炎癥因子等的表達(dá)來(lái)評(píng)價(jià)抗敏成效。

二、植物實(shí)驗(yàn)

除斑貼實(shí)驗(yàn)以外，多為抑制炎癥乃至過(guò)敏反響，這方面的研討不只限于皮膚，而且深化到外部器官和機(jī)體免疫系統(tǒng)。

1、豚鼠皮膚瘙癢模型止癢實(shí)驗(yàn)

2、豚鼠皮膚脫水模型的皮膚修復(fù)實(shí)驗(yàn)

3、主動(dòng)皮膚過(guò)敏模型抗敏實(shí)驗(yàn)

2002年11月7日歐洲議會(huì)與歐盟理事會(huì)在布魯塞爾達(dá)成協(xié)議，決議“從2009年起在歐盟范圍內(nèi)制止運(yùn)用植物停止化裝品毒性和過(guò)敏性實(shí)驗(yàn)，2013年制止運(yùn)用植物停止化裝品原料的平安性評(píng)價(jià)；逐漸不允許其成員國(guó)從本國(guó)出口和銷售進(jìn)舉植物實(shí)驗(yàn)的化裝品。”

三、人體實(shí)驗(yàn)

大局部抗敏成效化裝品原料及產(chǎn)品的開(kāi)發(fā)環(huán)節(jié)中，人體實(shí)驗(yàn)依然是必不可少的一局部，普通為激起斑貼實(shí)驗(yàn)。此外人體實(shí)驗(yàn)中還可以停止角質(zhì)層水分含量實(shí)驗(yàn)、皮膚紅斑指數(shù)測(cè)試、皮膚其他生理指數(shù)測(cè)試以及皮膚厚度、皮膚外表結(jié)構(gòu)的改動(dòng)，從而判別皮膚的敏理性狀況。

1、客觀評(píng)價(jià)

包括視覺(jué)評(píng)價(jià)（專家或醫(yī)生評(píng)價(jià)）和受試者自我評(píng)價(jià)（調(diào)查詢卷）。

2、半客觀評(píng)價(jià)

罕見(jiàn)的有乳酸刺痛實(shí)驗(yàn)和辣椒素實(shí)驗(yàn)等。

乳酸刺痛實(shí)驗(yàn)：在室溫下，將5％或10％的乳酸水溶液50μL涂抹于鼻唇溝及恣意一正面頰，區(qū)分在0，2.5，5和8 min時(shí)訊問(wèn)受試者的自覺(jué)癥狀，按4分法停止評(píng)分（0分為沒(méi)有刺痛感，1分為輕度刺痛，2分為中度刺痛，3分為重度刺痛）。然后將兩次分?jǐn)?shù)相加，總分≥3分者為乳酸刺痛反響陽(yáng)性。

辣椒素實(shí)驗(yàn)：將直徑為0.8 cm的兩層濾紙放置于一側(cè)鼻唇溝外約1 cm處及恣意一正面頰，將含量為0.1％的辣椒素50μL置于濾紙上，訊問(wèn)受試者的覺(jué)得（1分為勉強(qiáng)可以發(fā)覺(jué)，2分輕度可以發(fā)覺(jué)，3分為中度可以發(fā)覺(jué)，4分為重度可以發(fā)覺(jué)，5分為疼痛）。假設(shè)受試者的灼痛覺(jué)得繼續(xù)時(shí)間>30 s，且水平≥3分者為陽(yáng)性。

SLS皮膚撫慰實(shí)驗(yàn)：將一定濃度的SLS置于斑試器內(nèi)，局部封包于受試部位，24 h后去除斑試器并于去除斑試器后特定時(shí)間觀察受試部位皮膚變化，停止I臨床評(píng)分及無(wú)創(chuàng)儀器檢測(cè)。

3、客觀評(píng)價(jià)

客觀評(píng)價(jià)法是經(jīng)過(guò)儀器對(duì)受試者運(yùn)用化裝品前后的皮膚形狀參數(shù)停止采集、樣本剖析和統(tǒng)計(jì)剖析，進(jìn)而對(duì)化裝品停止成效評(píng)價(jià)的一種方法。

經(jīng)皮水分流失（TEWL）、皮膚厚度和密度、水分含量、油脂分泌量、酸堿度（pH值）、紅斑指數(shù)（Erythema index，EI）、色素指數(shù)（Melanin index，MI）及彈性（R2／R5／R7）等基礎(chǔ)生理目的，可以在一定水平上將其屏障功用停止量化表征。

END

參考資料：

[1] 樊琳娜. 敏感皮膚成因解析及化裝品抗敏活性評(píng)價(jià)停頓. 日用化學(xué)工業(yè). 2015.

[2] 王歡. 化裝品成效評(píng)價(jià)(V)-舒緩成效宣稱的迷信支持. 日用化學(xué)工業(yè). 2018.

[3] 董銀卯. 化裝品配方設(shè)計(jì)7步. 化學(xué)工業(yè)出版社.

化裝品成效評(píng)價(jià)項(xiàng)目

項(xiàng)目背景：以后我國(guó)化裝品產(chǎn)業(yè)飛速開(kāi)展,化裝品品牌百花齊放，化裝品技術(shù)質(zhì)量逐漸提高。與此同時(shí)化裝品監(jiān)管法規(guī)不時(shí)完善，化裝品消費(fèi)者需求日益提升，化裝品平安效果亟需品牌廠家注重。

項(xiàng)目運(yùn)用

1、 法規(guī)要求

化裝品監(jiān)視管理?xiàng)l例（2021.01.01）

化裝品注冊(cè)人，備案人對(duì)化裝品的質(zhì)量平安和成效宣稱擔(dān)任。

2、 成效定量剖析

3、 原料開(kāi)發(fā)

4、 配方挑選

5、 銷售支持

6、 學(xué)術(shù)運(yùn)用

項(xiàng)目列表

出口及國(guó)產(chǎn)化裝品備案專業(yè)效勞和優(yōu)勢(shì)

? 一站式效勞——專業(yè)、高效、省時(shí)、省心。

? 專業(yè)團(tuán)隊(duì)——高素質(zhì)專業(yè)技術(shù)隊(duì)伍，熟懂法規(guī)、研發(fā)、質(zhì)控等各個(gè)環(huán)節(jié)，滿足企業(yè)的各種需求。

? 專屬客服——專屬客服為客戶處置，央求、受理，進(jìn)度跟蹤，任務(wù)協(xié)調(diào)報(bào)揭發(fā)放以及財(cái)務(wù)結(jié)算等進(jìn)程中的各種效果，協(xié)助客戶浪費(fèi)時(shí)間和本錢。

? 威望——洞悉行業(yè)方向，緊跟行業(yè)政策，協(xié)助客戶有效應(yīng)對(duì)法規(guī)更新和市場(chǎng)變化。