病毒保存液檢測

1. 病毒保存液檢測對象
毒株：甲型流感病毒HINI (VR- 1469)
細(xì)胞：MDCK細(xì)胞
2.病毒保存液檢測步驟：
1）取樣品病毒保存液（非滅活型） 9.8mL，加入0.2mL病毒原液混勻，分裝若干測試液，存至要求溫度；
2）保存至對應(yīng)天數(shù)后取出測試液，檢測病毒滴度；
a）10倍倍比稀釋測試液；
b）將稀釋液加入含生長至單層的MDCK細(xì)胞的96孔細(xì)胞培養(yǎng)板上，并設(shè)置正常對照組，加等量培養(yǎng)液；
c）置于35'C、5%CO2的培養(yǎng)箱中孵育60 min后棄去上清液，加入雙抗400 IU/mL的維持培養(yǎng)液繼續(xù)孵育3~5天，每天觀察細(xì)胞增長狀況；
d）當(dāng)接種病毒的MDCK細(xì)胞出現(xiàn)變圓或縮小等病變現(xiàn)象時，記錄產(chǎn)生細(xì)胞病變的情況；
e）根據(jù)Reed-Muench公式計算半數(shù)感染量TCID50。

病毒保存液是一種病毒采樣管內(nèi)添加的專門用來保護(hù)鼻咽拭子采樣后樣本的保護(hù)型液體介質(zhì)。病毒保存液起到保存病毒樣本的作用，既保證了核酸病毒的完整性，又便于后期的檢測準(zhǔn)確性，病毒保存液檢測目的驗證病毒滅活效果。
目前市面上有兩種病毒保存液，分別是滅活型病毒保存液和非滅活型病毒保存液。
滅活型病毒保存液是為了裂解和滅活病毒的，它可以保護(hù)檢測人員不受病毒的第二次感染傷害。滅活型病毒保存液主要是核酸提取裂解液改良的病毒裂解性保存液，里面添加有高濃度的裂解鹽，能夠迅速高效地使待測樣本里的病毒蛋白裂解失活，同時又含有RNA酶抑制劑，這樣既能保護(hù)病毒核酸不被降解，又能保證核酸的完整性而不影響后續(xù)的檢測結(jié)果。在常溫下也可以保存相對較長的時間，節(jié)省了病毒樣本和運輸?shù)某杀尽?br> 非滅活型病毒保存液是為了保留病毒的蛋白質(zhì)外殼以及病毒核酸DNA或者是RNA，這樣就可以保證病毒樣本核酸在送檢過程中的完整性，雖然操作失誤時會也有一定的感染性風(fēng)險，但是這種保存液最大程度地保持了病毒樣本的原始性，是一種培養(yǎng)型的病毒運輸介質(zhì)，需要注意的是長時間保存的需要在采樣后保持嚴(yán)格的低溫保存。

健明迪檢測可開展針對流感病毒、腸道病毒、冠狀病毒、皰疹病毒等病毒保存液病毒滅活效果檢測，病毒保存液檢測可針對不同保存溫度、不同保存時間等不同條件下的病毒活性及病毒滅活率。

病毒保存液檢測報告模板主要包含試驗毒株、實驗批次、保存溫度、保存天數(shù)、病毒滴度、病毒活性及病毒滅活率等檢測數(shù)據(jù)，具體如下圖：

健明迪檢測可開展針對流感病毒、腸道病毒、冠狀病毒、皰疹病毒等病毒保存液病毒滅活效果檢測，病毒保存液檢測可針對不同保存溫度、不同保存時間等不同條件下的病毒活性及病毒滅活率。