茶葉微生物怎么鑒定 ?【微生物檢驗技術】?健明迪

在全民關注食品平安的當下，食品微生物檢測作為食品平安檢測不可或缺的一環，也成為食品平安檢測的重中之重。

經過食品微生物檢驗，可以判別食品加工環境及食品衛生狀況，可以對食品被細菌污染的水平作出正確的評價，那么在食品微生物檢測中，大家經常會遇到哪些效果？又該如何處置？一同來看一下！

| 01.菌落總數的測定，只做一個稀釋度行嗎？

| 02.同一個稀釋度，菌落總數一個在計數范圍，一個不在計數范圍，怎樣計？

| 03.涂抹樣品的檢測，應當怎樣計數和報告？

| 04.培育基配置有哪些留意事項？

| 05.剩余的培育基再次運用能否重新滅菌？

| 06.霉菌計數如何保證結果準確？

| 07.無菌水、生理鹽水、磷酸鹽緩沖液三者有什么區別？

| 08.培育皿接種后為什么要倒置？

01 菌落總數的測定,只做一個稀釋度行嗎？

不可行。在GB 4789.2中要求每個樣品選擇2-3個適宜的稀釋度停止檢測。即使一個樣品曾經基本可以確定了菌落數了，也建議多檢測一個稀釋度，多一個稀釋度也會對檢測結果停止驗證，只測一個稀釋度會存在風險。

另外假設嚴厲依照國標要求，這樣的檢測也是不契合要求的，某些要求嚴厲的外審部門能夠會對此開具不契合項。因此在檢測中還是應該嚴厲依照國度規范執行。

02 同一個稀釋度，菌落總數一個在計數范圍，一個不在計數范圍，怎樣計？

同一稀釋度的兩個平板，一個在計數范圍內，一個不在計數范圍內，則以在計數范圍內的平板的菌落數乘以稀釋倍數作為報告結果。

舉例來說明，某樣品檢測結果：10-1兩平板菌落數區分為320、288，10-2稀釋度兩平板菌落數為27、23，則樣品的檢測結果應選取288停止報告，報告結果為2.9*103CFU/g。

03 涂抹樣品的檢測，應當怎樣計數和報告？

涂抹樣品檢測的計數是比擬復雜的，給大家舉例子來說明！

假設你涂抹的樣品面積是25cm2，采樣的涂抹液是10mL，而檢測只吸取1mL樣液，即檢測的是原樣品的10-1的稀釋度，即平板計數菌落*10為樣品中的菌落數。結果報告就是菌落數/取樣面積。例如，取樣面積是25cm2，檢測平皿上計數為13，則結果報告應該為13*10CFU/25cm2。

04 培育基配置有哪些留意事項？

(1) 滅菌溫度要嚴厲控制，依照要求滅菌，尤其含糖量較高的培育基溫度不應太高，過高會招致糖分焦化，影響質量；

(2) 瓊脂培育基不能重復溶化。重復溶化會破壞培育基中的營養成分；

(3) 培育基不能重復滅菌，重復滅菌也會招致營養成分的破壞；

(4) 含瓊脂的培育基滅菌后，要搖勻。

05 剩余的培育基再次運用能否重新滅菌？

這分為兩種狀況。*種狀況，曾經凝結后重新消融后運用的，依據GB 4789.28-2013中明白規則，未用完的培育基不可重新凝結留待下次運用。遇到這種狀況，培育基只能棄置，并且國標要求，棄置也需求契合相關法律法規的規則。

第二種狀況，初次滅菌后未用完的培育基，可待培育基凝結后再停止保管。但保管條件需避光枯燥，保證其成分不會發作改動。再次運用時依照要求停止消融即可，不可二次滅菌。初次滅菌已開封但未運用完的培育基，不建議再次運用，畢竟存在風險。但若是液體培育基，就不存在消融的進程，初次滅菌后未運用終了可依照國標要求保管，運用時需求保證培育基成分不發作改動，不可停止二次滅菌。若無法保證培育基能否契合要求，應當棄置。

06 霉菌計數如何保證結果準確？

霉菌菌落由孢子和菌絲組成，相當分散，在直徑9cm的平皿里，菌落數稍多就相互交叉堆疊，影響計數，但數量太少又會發生較大的誤差，因此選擇適當的稀釋度計數是保證結果準確的關鍵環節之一。

我們對這方面作了一些觀察研討，首先是將實驗菌株的斜面培育物制成含有約106個/ml的孢子懸液，并用血球計數器在顯微鏡下準確計數，然后將孢子懸液作10-1~10-6倍稀釋，吸取不同稀釋度的稀釋液接種于PDA，25℃培育5天后計數。30種罕見霉菌的兩種不同計數方法所得結果比擬顯示，大局部菌株每平板含有10~50個菌落的稀釋度時的計數與顯微鏡計數結果*接近；有近一半的菌株，每個平板含50~100個菌落已較難計數，而大局部菌株，超越100個/平皿或小于10個/平皿的計數結果就與顯微計數結果存在較大差異，因此，應盡量選擇10~50個/平皿的稀釋度停止霉菌計數。

而對上述提及的菌絲很豐厚、菌落特別分散的毛霉、根霉、犁頭霉等菌株，則應在更少的范圍內計數(30個/平皿以內)。為控制霉菌的生長速度和菌落的生長范圍，可在培育基中添加大批抗生素，如氯霉素(50~100mg/L)，金霉素(20~100mg/L)，慶大霉(50mg/L)，土霉素(100mg/L)等。

07 無菌水、生理鹽水、磷酸鹽緩沖液三者有什么區別？

無菌水就是復雜的檢測水停止滅菌；生理鹽水是0.85%的NaCl水溶液；磷酸鹽緩沖液普通是選擇磷酸二氫鈉和磷酸氫二鈉依照一定比例配制的緩沖液。

在食品微生物檢測中，三者*主要的區別在于對菌的維護作用。無菌水不存在對菌的維護，由于浸透壓的作用，還能夠形成菌吸水脹裂死亡；生理鹽水的浸透壓基本與菌的細胞液相當，會對菌有一定的維護。磷酸鹽緩沖液除了在浸透壓方面對菌有維護作用，對pH也有一定的緩沖作用，因此對菌有更好的維護。國標要求，微生物檢測需求用生理鹽水或磷酸鹽緩沖液稀釋。但也有局部研討標明，檢測樣品若NaCl含量超越10%也可以運用無菌水稀釋，但并未被國度規范認可。

08 培育皿接種后為什么要倒置？

接種后，將平板倒置，既可防止冷凝水滴到培育基上，防止雜菌污染；又利于菌種的生長、繁衍和計數。

1.利于菌種的生長和繁衍

培育條件為必需通風時，倒置的平板可以增加培育基外表的空氣活動，減慢培育基中水分蒸發的速度，堅持瓊脂等固體培育基中的水分，充沛的維持瓊脂等凝結劑的彈性，延伸培育基出現干裂的時間。所以，倒置培育有利于菌種的繁衍和生活。假設將平板正放，大約幾天時間培育基就會出現水分流失和開裂的狀況。可見，防止培育進程中水分流失是十分重要的。

2.防止培育進程中雜菌污染平板

倒置培育時，由于平板內的空氣不易活動，能盡能夠的增加外來雜菌的侵染，防止雜菌污染培育基和培育物。經過實驗觀察，發現假設平板正放，平板的周邊容易長出雜菌菌落。

3.有利于營養物質富集，方便觀察計數

平板倒置停止微生物培育時，受重力的影響，一方面培育基中的營養物質主要會富集在培育基外表及外表以下的次層，有利于微生物生長；另一方面培育基外表熟長的菌落相對不會太快分散，觀察時有利于區分菌落特征。

其它

1）由于如今普通拿平板的操作均為：小蓋子朝向手心，五指張開抓住平板，大拇指推進平板的大蓋子停止操作，所以倒置平板有利于操作；

2）其他人翻開培育箱的時分一不小心就把平皿蓋給翻開了，倒置培育的時分不容易翻開。

以上就是食品微生物檢測小編關于食品微生物檢測罕見效果的分享，希望能在大家為此困惑的時分有所協助。你們關于食品微生物檢測還有哪些閱歷或難點呢？歡迎大家在后臺留言共同交流討論。

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