艾滋病人源化小鼠模型

1.該模型制備比較成熟，國內外都有此模型，構建和評價指標一致，所以該模型應用廣泛，具有統一的操作規程。

2. 該模型制備的關鍵：1）小鼠必須是重度免疫缺陷的，而且飼養環境必須潔凈；2）HIV操作需要生物安全。

3.此模型具有完善的人的免疫系統，HIV感染后，具有艾滋病病人相似的臨床癥狀，所以具有很高的比較醫學應用價值。

1. 造血干細胞純化：CD34+細胞的純度，流式染色在90%以上；

2. 模型構建成功：1）檢測外周血、脾臟和骨髓的人細胞的比例，一般在hCD45在20-60%；2）組化染色脾臟、淋巴結、骨髓和肝臟，都有人細胞；3）解剖后，在腸系膜位置，有淋巴結。

3. 病毒學檢測

1. NRG小鼠飼養：NRG小鼠需要飼養在隔離器或者單獨的房間IVC中。

2.純化造血干細胞：用CD34純化干細胞試劑盒，純化臍帶血中造血干細胞，純化的細胞當天移植。

3. 將 4-6 周NRG小鼠提前2小時輻照，劑量是 1.5Gy。

4.將純化的 CD34+造血干細胞尾靜脈注入照射后的小鼠體內，每只小鼠注射1×10e5 細胞。

5.12周后，采血檢測人細胞的比例：抗小鼠 PE-CD45；抗人 APC CY7-CD45；抗人 APC-CD3。

6. 麻醉小鼠，用HIV病毒，靜脈感染。

7.感染4周后，檢測HIV病毒的RNA。

一、疾病概述

艾滋病(Acquired Immunodeficiency Syndrome, AIDS)，是由人免疫缺陷病毒（Human Immunodeficiency Virus, HIV）引起，以全身免疫系統嚴重損害為特征的傳染性疾病，是20世紀危害人類健康和生命最嚴重的病毒性疾病之一。HIV是一種能攻擊人體免疫系統的病毒。它把人體免疫系統中最重要的CD4T淋巴細胞作為主要攻擊目標，大量破壞該細胞，使人體喪失免疫功能。因此，人體易于感染各種疾病，并可發生惡性腫瘤，病死率較高。HIV在人體內的潛伏期平均為8～9年，患艾滋病以前，可以沒有任何癥狀地生活和工作多年。

艾滋病早已成為關注的公共衛生和社會熱點問題，艾滋病的預防與治療也成為當代生物醫學研究的前沿熱點之一。

二、模型背景

1、細胞/基因/病原/其他造模因素信息

1. 人造血干細胞，來源臍帶血。用CD34純化試劑盒，純化得到造血干細胞。

2. 艾滋病病毒：HIV

2、實驗動物背景信息

重度免疫缺陷小鼠，NRG，NOD.Cg-Rag1-/-l2rg-/-

3、研究背景

該動物模型的研究目的及意義；該動物模型的國內外研究進展并附參考文獻。

免疫系統人源化的小鼠模型，在一定程度上模擬了免疫系統健全的人，可以用于針對免疫系統的各種疾病模型，該模型可以用于細胞發育、感染性疾病、自身免疫病以及腫瘤治療等，為研究臨床疾病提供了良好的研究平臺。

人源化小鼠用于HIV的研究最為廣泛，也最成熟，可以用于HIV研究的各個領域，包括致病機理、新型治療手段和疫苗研究等。Chen等在HIV感染的人源化小鼠上，證明了干擾素在HIV致病中的雙重作用；Nussenzweig團隊利用HIV感染的人源化小鼠，一直致力于研究抗HIV的廣譜性中和性抗體，已經取得了非常好的臨床結果；HIV感染的人源化小鼠模型也常用于評價各種HIV治療的藥物。

文獻：

1. Cheng L, Yu H, Li G, Li F, Ma J, Li J, ChiL, Zhang L, Su L. (2017). "Type I interferons suppress viral replicationbut contribute to T cell depletion and dysfunction during chronic HIV-1infection." JCI Insight 2(12).

2. Cheng L, Ma J, Li J, Li D, Li G, Li F,Zhang Q, Yu H, Yasui F, Ye C, Tsao LC, Hu Z, Su L, Zhang L. (2017)."Blocking type I interferon signaling enhances T cell recovery and reducesHIV-1 reservoirs." J Clin Invest 127(1): 269-279.

3. Horwitz, J. A., et al. (2017)."Non-neutralizing Antibodies Alter the Course of HIV-1 Infection InVivo." Cell.