抗病毒試驗是一種藥理實驗方法,通過測定待測樣本和對照樣本中病毒的減少量來評估其抗病毒活性。
抗病毒活性試驗的步驟包括:
樣品制備:將待測樣本制備成5×5 cm的正方形,并將一定量的病毒液滴加到每一塊待測樣本和對照樣本上。
病毒滴度測定:將洗脫回收的病毒接種到96孔板的細胞上,并進行10倍梯度稀釋,且每個稀釋梯度不少于4個復孔。將96孔板放入37℃、5%CO2培養箱中孵育培養3~7天記錄細胞病變的情況,計算測試表面的抗病毒率。
病毒抑制試驗:計算待測樣本相對于對照樣本上病毒的減少量,這種減少量被稱為R值,是比較對照樣本和測試樣本中回收的病毒量之間的差異,都以10為底的對數值表示。
抗病毒試驗項目包括病毒血清學試驗、病毒分離和鑒定、病毒抗體檢測、病毒基因序列分析等。
病毒血清學試驗是檢測病毒的抗原或者抗體的試驗,如果檢測結果呈陽性,可能提示機體被病毒感染。其檢查項目根據不同的病毒而定,臨床上常用于檢測乙肝病毒、丙肝病毒、艾滋病病毒等微生物的感染情況。
常用的病毒試驗項目包括:
乙肝兩對半:用來檢查是否感染乙肝病毒,乙肝五項包括乙肝表面抗原、乙肝表面抗體、乙肝e抗原,以及乙肝e抗體和乙肝核心抗體。如果表面抗原陽性,則說明感染乙肝病毒,如果同時存在乙肝e抗原陽性、乙肝核心抗體陽性,說明是大三陽,如果乙肝e抗原呈陰性,乙肝e抗體和乙肝核心抗體為陽性,提示為小三陽。
丙肝抗體檢測:如果檢查丙肝抗體陽性,提示感染過丙肝病毒,但不能鑒別是現在感染,還是既往感染,因此需要進一步檢測,診斷是否存在丙肝,以便于及時進行治療。
艾滋病毒:通過檢測人體內是否含有特異性抗艾滋病病毒抗體,間接診斷機體是否有艾滋病病毒感染。艾滋病病毒侵入機體后,刺激機體的免疫系統,產生特異性抗體,當在體內檢測出該抗體,說明感染艾滋病病毒。
抗病毒試驗方法可分為三種:
雞胚法:利用許多病毒能在雞胚中繁殖及引起病變,測定藥物的抗病毒作用。
整體動物法:觀察投入藥物的感染病毒動物的病變、死亡及存活數,經統計學方法計算,可得拜藥物對病毒是否有效。
組織培養法:幾乎所有的人類病毒都可在離體細胞中生長繁殖,實驗通過檢驗藥物能否保護細胞免受病毒感染,可得知該藥物杭病毒的效果。
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