DOCA誘導急性鹽敏感性高血壓小鼠模型

動物癥狀觀察：

表現為體重減輕、弓背豎毛，在回輸后的一個月后死亡。

（1）DOCA加單側腎切除對小鼠血壓的影響

C57小鼠單側腎切除加DOCA之后，采用植入子電遙感檢測小鼠血壓情況。結果顯示，對照組小鼠血壓較為恒定，但是進行單側腎切除外加DOCA之后，小鼠的收縮壓顯升高。說明單側腎切除外加DOCA能夠穩定的誘導小鼠血壓的升高。成為研究鹽敏感性高血壓研究的理想模型。

（2）DOCA加單側腎切除對小鼠外周血白細胞分化的影響

C57小鼠單側腎切除加DOCA之后，采用流式細胞術檢測小鼠外周血白細胞表達情況。結果顯示，與對照組小鼠相比，進行單側腎切除外加DOCA之后，高鹽喂養的小鼠外周血白細胞的表達顯著升高。說明單側腎切除外加DOCA之后，小鼠對高鹽干預變得十分敏感，高鹽飲食能夠穩定的誘導單側腎切除外+DOCA外周血白細胞的大量表達高，從而為該鹽敏感性高血壓研究的理想模型提供了理論依據。

（3）DOCA加單側腎切除對小鼠血管白細胞浸潤的影響

C57小鼠單側腎切除加DOCA之后，采用流式細胞術檢測小鼠主動脈白細胞浸潤情況。結果顯示，與對照組小鼠相比，進行單側腎切除+DOCA之后，高鹽喂養的小鼠主動脈白細胞浸潤顯著升高。由（3）可知0說明單側腎切除外加DOCA之后，小鼠對高鹽干預變得十分敏感，高鹽飲食能夠穩定的誘導單側腎切除外+DOCA外周血白細胞的大量表達高。外周血中大量表達分化的白細胞進一步浸潤血管，誘發血管炎癥反應，從而損傷血管使得血壓調控收到損傷，進而發展成為為該鹽敏感性高血壓。

1.C57小鼠，名稱：C57，近交系（Inbred Rat）

品系來源 ：1)遺傳背景及亞系:1921年Ltle用 Abbg Lathrop的小鼠株雌鼠57號與雄鼠52號交配，而得C57BL6。亞系:C57BL6、C57B/6、C57BL/6N等。 (2)毛色基因標記：aa、BB、CC（黑色） (3)主要遺傳學特征：a免疫學特征：一般飼養條件下免疫球蛋白的量隨年齡而增加，而到生后20個月時則1gG增長緩慢，無菌飼養的絕對量較低。gM水平較高，出生12月以后，有的個體超過80ug/mL。無菌飼養的動物lgM量比一般飼養的高。細胞免疫低下者少見，這可能與自發腫瘤少有關。b。形態學特征：在新生鼠中，雌鼠為16.8%，雄鼠3%為小眼或無眼癥。0.6%后肢可見多趾癥，另外水頭癥占2%4%，耳頭癥占0.4%，交合不全占3%。c生理學特性：有強嗜酒精性。對放射性照射為中等強度感應度，LD50為630+4R，將雄鼠皮膚移植到同系的雌鼠身上，約20日被排斥掉，這是因為在組織相容性抗原中的雄抗原在C57BL中非常顯著。d癌發生率：乳癌發生率低，為01%，白血病為7%-16%化學致癌成功率低，放射性照射較容易誘發肝癌。

2.高血壓對照小鼠：C57小鼠，名稱：C57，同類系（Consomic Rat）

3.誘導方法：

（1）單側腎切除：C57小鼠根據體重，三溴乙醇麻醉0.18ml/10g體重，（360mg/kg體重）（三溴乙醇儲存液：25g三溴乙醇+15.5ml叔戊醇，使用液：0.50ml儲存液+39.5ml生理鹽水），俯臥位固定于加熱墊上保持體溫，腹部脫毛膏脫毛，酒精消毒處理，無菌手術剪剪開腹部皮膚，依次暴露表皮層，真皮層并裸露左腎，結扎左腎動脈，手術剪取下左腎，依次縫合真皮層表皮層，200ul青霉素注射。得單側腎切除小鼠。

（2）皮下植入DOCA緩釋泵：單側腎切除三天之后，背部頸部脫毛膏脫毛，酒精消毒處理，無菌手術剪剪開后背頸部皮膚，用鑷子將皮下探查出一個可以足夠裝下藥品的空間，將DOCA 緩釋泵塞入皮下，鑷子將該處皮膚對齊復合，無菌縫合線縫合皮膚，放置在加熱板上保暖，待蘇醒后放回鼠盒，手術后用止痛果凍緩解疼痛。

高血壓是由多基因、多環境因素及個人不良習慣相互作用而導致的一種慢性復雜疾病，也是危害人類健康的主要疾病之一。鹽是高血壓的重要環境因素，個體對鹽負荷或限鹽呈現不同的血壓反應，因此存在鹽敏感性問題 [1]。鹽敏感性是高血壓、心腦血管病和其它疾?。ㄈ缦?、胃癌和腎功能不全等）發病及致死的一個潛在危險因素[2]。因此在高血壓臨床診治過程中，考慮鹽敏感性將有利于對高血壓分類、危險分級以及對癥治療。

鹽敏感性通常涉及人口、種族、社會因素以及腎功能、激素水平和飲食習慣等[3]。不同種族和人群鹽敏感性個體的檢出率不同，而且血壓的鹽敏感性隨年齡增長而變化，特別是高血壓患者。鹽敏感性由Weinberger[4]給出定義：靜脈滴注2L生理鹽水，測量平均動脈壓（MAP），次日早晨給予低鈉飲食后再測量MAP，兩次MAP相差≥10mmHg為鹽敏感性，否則為鹽耐受性。Yatabe [5]定義鹽敏感指數（SSI）為低鹽和高鹽飲食后MAP的差值與低鹽飲食MAP的商，若SSI≥5%為鹽敏感性。

高鹽攝入引起血壓升高主要有兩方面原因：一方面是腎小管對Na+ 重吸收增加，導致水鈉潴留，血漿容量增加，從而血壓升高；另一方面是內源性哇巴因物質分泌增多，特異性抑制鈉泵，胞內鈉離子濃度增加，Na+/Ca2+交換體被激活，細胞內Ca2+ 濃度升高，最終導致血管平滑肌或心肌收縮，引起高血壓。由于鈉水平衡失調在鹽敏感性高血壓中起著主要的作用，DOCA鹽造成高血壓的方法被廣泛應用[6]，但用的劑量和持續時間各不相同。一般是切除一側腎臟，然后皮下或肌肉注射DOCA油劑或懸液，劑量為15-50mg不等，連續數周；也可皮下埋藏DOCA丸劑40-75mg，均溶于1%NaCl溶液。此動物有腎和血管病理改變。

其血壓升高機制：制作過程中使用了大量的DOCA（醛固酮前提），它與醛固酮有相似的生理作用，反饋性抑制循環腎素-血管緊張素系統，導致血漿腎素活性低下，是一種低腎素型高血壓模型。該模型是一種繼發性高血壓模型，與人類高血壓中的原發性醛固酮增多癥相似。故可用于原發性醛固酮增多所致的高血壓研究。另外，文獻中有用DOCA鹽誘導的高血壓大鼠進行腎臟的研究，如波生坦對高血壓大鼠腎臟的保護作用的研究。另外，Ben-Ishay等在DOCA鹽及一側腎切除處理后的動物中選擇血壓高的血壓不高的分別進行近親交配，到第20代，確立了兩系動物，即后來命名的以色列高血壓大鼠（SBH）和以色列正常血壓大鼠（SBN），前者血壓比后者稍高，并對DOCA鹽十分敏感。