動(dòng)脈粥樣硬化家兔模型

動(dòng)物癥狀觀察：

表現(xiàn)為體重減輕、弓背豎毛，在回輸后的一個(gè)月后死亡。

實(shí)驗(yàn)中涉及動(dòng)物的操作程序已經(jīng)得到中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物研究所實(shí)驗(yàn)動(dòng)物使用與管理委員會的批準(zhǔn)(ILAS-GC-2012-001)。

1. 與正常對照組相比較模型組家兔的各時(shí)間點(diǎn)血脂各項(xiàng)指標(biāo)檢測結(jié)果。

飼喂高脂飼料5周的家兔采血為高脂肪血且有乳糜，檢測結(jié)果CHO（總膽固醇）和LDL-C（低密度脂蛋白膽固醇）明顯增高, 比正常對照高出15倍和12倍。 TG（甘油三酯）和HDL-C（高密度脂蛋白膽固醇）也有升高，但相比之下增高不明顯。之后繼續(xù)喂食高脂飼料至11周，TG值一直持續(xù)升高至9周，以后才保持平穩(wěn)，其它血脂指標(biāo)在喂飼高脂飼料6周至11周均大致趨于平穩(wěn)，沒有出現(xiàn)大幅度升高或者降低的現(xiàn)象；如圖1~4所示。

2.大體解剖及組織病理學(xué)觀察結(jié)果

對造模11周的動(dòng)物進(jìn)行解剖、取材做病理學(xué)方面分析發(fā)現(xiàn)。模型組動(dòng)物主動(dòng)脈弓及胸主動(dòng)脈內(nèi)膜面可見大量灰白色斑塊，腹主動(dòng)脈內(nèi)膜面可見灰白色斑塊，主動(dòng)脈弓及胸主動(dòng)脈斑塊面積比可達(dá)到44%。頸總動(dòng)脈管壁增厚，大量脂質(zhì)沉積，泡沫細(xì)胞增生。心臟內(nèi)小動(dòng)脈壁增厚，管腔狹窄。肝細(xì)胞脂肪變性，脾臟中央動(dòng)脈管壁增厚，管腔狹窄。主動(dòng)脈弓內(nèi)膜明顯增厚，脂質(zhì)大量沉積，泡沫細(xì)胞增生，灶性壞死，中膜鈣化（圖5）。

圖5.主動(dòng)脈弓內(nèi)膜明顯增厚，脂質(zhì)大量沉積，泡沫細(xì)胞增生，灶性壞死，中膜鈣化

1. 高脂飼料的配方：膽固醇1%、豬油5%、蛋黃粉5%、豬膽鹽0.2%和兔基礎(chǔ)飼料88.8%。

2. 適應(yīng)期：適應(yīng)期動(dòng)物喂食普通飼料，適應(yīng)4天。

3. 過渡期：動(dòng)物每天喂食喂普通與高脂的混合飼料（1:1混合）150g約1周。

4. 造模期：每天喂高脂飼料，每只動(dòng)物每天喂飼量均為150g，連續(xù)喂食11周。

一、 動(dòng)脈粥樣硬化概述

動(dòng)脈粥樣硬化（atherosclerosis，AS） 是由遺傳、環(huán)境等多因素導(dǎo)致的老年多發(fā)性疾病，近年來有逐漸年輕化和上升趨勢。隨著社會的發(fā)展和生活水平的提高，感染性疾病所導(dǎo)致的死亡不斷減少，而動(dòng)脈粥樣硬化疾病導(dǎo)致的死亡迅速增多，目前已成為人口死亡的首位原因。

動(dòng)脈粥樣硬化的發(fā)病機(jī)理學(xué)說甚多，如脂質(zhì)浸潤學(xué)說、血栓源學(xué)說、血液動(dòng)力學(xué)學(xué)說、中層平滑肌細(xì)胞增生學(xué)說、內(nèi)膜損傷學(xué)說及受體學(xué)說等，現(xiàn)逐漸明確動(dòng)脈粥樣硬化的發(fā)病機(jī)理是復(fù)雜的，是綜合性的較長過程。動(dòng)脈壁內(nèi)皮損傷是動(dòng)脈粥樣硬化的始動(dòng)因素。動(dòng)脈壁內(nèi)皮細(xì)胞有調(diào)節(jié)血管張力、血管通透性、抗血栓形成及分泌多種活性物質(zhì)等重要生理功能。當(dāng)內(nèi)皮細(xì)胞受某些因素如：高血壓、高膽固醇血癥、血液中血管緊張素Ⅱ、腎上腺素、去甲腎上腺素、緩激肽的增高，血氧飽和度降低等的刺激均可使血管內(nèi)皮損傷。受損傷的內(nèi)皮細(xì)胞發(fā)生功能改變和滲透性增高，血液中的單核細(xì)胞粘附在內(nèi)皮細(xì)胞損傷處進(jìn)入內(nèi)皮下，吞噬脂質(zhì)成為泡沫細(xì)胞，形成脂肪斑。血小板聚集并粘附于內(nèi)皮的損傷處。吞噬細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞及粘附于內(nèi)皮細(xì)胞損傷處的血小板釋放生長因子刺激平滑肌細(xì)胞進(jìn)入內(nèi)膜并增殖，脂肪斑變成纖維斑塊，損傷的內(nèi)皮細(xì)胞通透性改變，血漿中的低密度和極低密度脂蛋白更多地進(jìn)入內(nèi)膜，導(dǎo)致動(dòng)脈粥樣硬化?？傊?，動(dòng)脈粥樣硬化是一種慢性炎癥性疾病。

動(dòng)脈粥樣硬化的癥狀主要決定于血管病變及受累器官的缺血程度，主動(dòng)脈粥樣硬化常無癥狀，冠狀動(dòng)脈粥樣硬化者，若管徑狹窄達(dá)75%以上,則可發(fā)生心絞痛、心肌梗塞、心律失常，甚至猝死。腦動(dòng)脈硬化可引起腦缺血、腦萎縮，或造成腦血管破裂出血，腎動(dòng)脈粥樣硬化常引起夜尿、頑固性高血壓、嚴(yán)重者可有腎功能不全。腸系膜動(dòng)脈粥樣硬化可表現(xiàn)為飽餐后腹痛便血等癥狀。下肢動(dòng)脈粥樣硬化引起血管腔嚴(yán)重狹窄者可出現(xiàn)間歇性跛行、足背動(dòng)脈搏動(dòng)消失，嚴(yán)重者甚至可發(fā)生壞疽 [6][8]。

二、動(dòng)脈粥樣硬化動(dòng)物模型簡介

積極研究動(dòng)脈粥樣硬化的發(fā)病機(jī)制,開發(fā)有效防治動(dòng)脈粥樣硬化的藥物是當(dāng)今藥理學(xué)研究領(lǐng)域的重要課題之一,研究并建立可靠的動(dòng)脈粥樣硬化動(dòng)物模型對于探明As的病因、發(fā)病機(jī)制及防治具有重要的意義。目前可以作為模型的動(dòng)物有：大鼠，小鼠，家兔，猴，豬，雞，鴿子等。其中家兔和鼠是現(xiàn)在研究AS最常用的模型動(dòng)物，兩者比較各有優(yōu)缺點(diǎn)：家兔不易自發(fā)性產(chǎn)生AS，但它對高脂飲食特別敏感，但是家兔的AS病變只與人的病變表面上相似，其病變中的脂類和巨噬細(xì)胞含量遠(yuǎn)比人類大。鼠具有抗AS性，但是作為實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，具有經(jīng)濟(jì)效益比較高，生存能力強(qiáng)，死亡率低的特點(diǎn)。為此，人們不斷摸索建立造型簡便且重復(fù)性好的AS模型。

兔是最早用以制造高脂血癥和動(dòng)脈粥樣硬化癥模型的動(dòng)物，至今仍然多被采用。它對外源性膽固醇的吸收率高，可達(dá)75～95%，大白鼠僅為40%，對高血脂的清除能力低，靜脈注入膽固醇后脂血癥可持續(xù)3～4天，大鼠僅為12小時(shí)，狗介于兩者之間。只要給兔含膽固醇較高的飼料，不必附加其它因素，經(jīng)3～4月即可形成明顯的動(dòng)脈粥樣硬化癥，而且與人體發(fā)生的病變相似，取血檢查也較方便。但是也有些缺點(diǎn)，如必須使血清膽固醇達(dá)到很高的水平才能形成斑塊，而這時(shí)內(nèi)臟易于發(fā)生脂質(zhì)沉著，動(dòng)物壽命短，低抗力差，容易繼發(fā)感染而死亡。再者，兔為草食動(dòng)物，其酯代謝與人體的酯代謝差異較大；實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)其冠狀動(dòng)脈病變主要呈現(xiàn)在心臟的小動(dòng)脈，而人主要發(fā)生在冠狀動(dòng)脈的大分支。