輻射誘導小鼠腸損傷模型

該模型在輻射導致的腸損傷機制研究及防治研究應用比較廣泛。不同品系的小鼠進行腸道細胞輻射敏感性具有差異。在應用時續作充分考慮。

制備動物模型使用的小動物照射設備自身帶有防護設施，使用安全。

1. 30天生存率 照射后 7 天, 對照組、照射組小鼠的存活率分別為100.0%、60.0%(P<0.05)。對照組的30 天生存率為100%, 照射組第11 天全部死亡。照射組死亡小鼠的平均生存天數分別為7.5天。

2. 全身照射小鼠小腸隱窩細胞凋亡的影響 小腸隱窩HE 染色和caspase-3 染色的結果圖2。在小腸隱窩HE 染色結果中, 照射組的每個隱窩平均凋亡細胞數量（1.98 ± 0.25）比對照組（0.14 ± 0.02 ）升高 (P < 0.001)。在小腸隱窩caspase-3免疫組化染色結果中, 對照組的陽性細胞較少（0.01 ± 0.01），照射組的每個隱窩平均凋亡細胞數量（0.51 ± 0.07）比對照組明顯升高(P<0.001)。

3.全身照射對小鼠小腸隱窩細胞p53表達的影響 小腸隱窩p53 染色結果顯示, 照射組每個隱窩p53陽性細胞數量（9.74 ± 1.27）比對照組（1.36 ± 0.15）有顯著升高 (P<0.001)。

圖 全身照射小鼠小腸隱窩細胞凋亡及caspase3、p-p38、p53、Ki67免疫組化染色

1. 實驗動物 SPF級C57BL/6 雄性小鼠由中國醫學科學院動物研究所提供。

2. 照射條件: 137Cs γ 射線輻射源購自加拿大原子能有限公司 (劑量率為0.76 Gy?min?1), 小鼠接受全身一次性照射, 劑量為7.2Gy。

3. 觀察30天生存率 每日觀察小鼠一般狀況，稱重；4. 實驗取材 照射 24 h 后頸椎脫臼處死小鼠, 取小腸組織, 依次用預冷PBS、10%中性福爾馬林沖洗內容物。然后將小腸切成小段, 用醫用透氣膠帶成捆包扎, 固定, 24 h 后脫水并制作石蠟塊。5.HE 染色和免疫組化實驗小腸組織HE 染色采用傳統實驗方法。鏡下通過形態學變化計數小腸隱窩內凋亡細胞數量。小腸組織內幾種蛋白表達檢測參考試劑說明書采用免疫組化兩步法檢測。主要步驟: 脫蠟, 0.1 mol?L?1檸檬酸鹽95 ℃修復30 min, 10%過氧化氫室溫孵育10 min, 第一抗體4 ℃孵育過夜,第二抗體37 ℃孵育30 min, DAB 顯色, 蘇木素復染, 脫水封片。然后盲法鏡下計數每只小鼠50 個完整小腸隱窩陽性細胞數。完整隱窩標準: 切面在隱窩中心,可見清晰、完整的隱窩腔, 隱窩底部有4～6 個分泌細胞, 分泌細胞至隱窩頂部每側至少有10 個隱窩上皮細胞。6. 數據處理 生存率用百分數表示, 兩組間比較采用卡方檢驗。其他數據以x ± s 表示, 組間比較采用t 檢驗。

一、疾病概述

急性放射病(acute radiation disease)是機體在短時間內受到大劑量(>1Gy)電離輻射照射引起的全身性疾病。外照射和內照射都可能發生急性放射病，但以外照射為主。外照射引起急性放射病的射線有γ線、中子和X射線等。

1. 病因

1）核輻射事故：核電站核事故或者輻射源管理不當導致的輻射源事故。

2）醫療事故：放射性核素和輻射裝置的醫療應用，也有可能發生醫療事故。

3）治療性照射：因治療需要而給予病人大劑量照射，可造成治療性急性放射病。如骨髓移植前常用大劑量(>6Gy)全身照射或全身淋巴結照射，作為骨髓移植前的預處理。

2.分型和分度 根據照射劑量大小、病理和臨床過程的特點，急性放射病分為三型，即骨髓型、腸型和腦型。

3.癥狀和體征 急性放射病的癥狀有：疲勞、頭昏、失眠、皮膚發紅、潰瘍、出血、脫發、白血病、嘔吐、腹瀉等。有時還會增加癌癥、畸變、遺傳性病變發生率，影響幾代人的健康。一般講，身體接受的輻射能量越多，其放射病癥狀越嚴重，致癌、致畸風險越大。

腸型急性放射病，是以胃腸道損傷為基本病變，以頻繁嘔吐、嚴重腹瀉以及水電解質代謝紊亂為主要臨床表現，具有初期、假緩期和極期三階段病程的嚴重的急性放射病。

4.診斷 急性放射病的診斷主要依據：受照射史；主要臨床表現；實驗室檢查；排除具有相似臨床表現的其他疾病。

5.腸型急性放射病的治療原則 根據病情程度，采取積極綜合對癥的支持治療，特別注意早期的妥善處理。對輕度腸型放射病病人盡早無菌隔離，糾正水、電解質、酸堿失衡，改善微循環障礙，調節植物神經系統功能，積極抗感染、抗出血，有條件時及時進行骨髓移植。對于重度腸型放射病病人應用對癥治療措施減輕病人痛苫，延長生命。

二、模型背景

1. 實驗動物背景信息

C57BL/6J小鼠。

2. 研究背景

腸型急性放射病在臨床上屬于危癥、重癥。死亡率很高。目前沒有確切有效的治療藥物。建立可靠的動物模型對闡明輻射誘導的腸損傷的病理生理變化機制，研究生物學標志物，研發防治措施具有重要的作用。其中小鼠、大鼠、犬有明顯的腸型放射病的表現，另外也有用貓、兔、小型豬、猴制作輻射腸損傷模型。但是以小鼠模型應用最多。

小腸上皮細胞增殖更新很快，對輻射損傷非常敏感。較低劑量1Gy暴露3-6h就會引起小腸隱窩細胞凋亡細胞增多。隨著劑量的增加上皮損傷逐漸加重。不同品系的小鼠有一定的差異。C57小鼠小腸細胞對輻射也比較敏感。腸型放射病多在受到大劑量照射后1周內死亡。這個模型對研究腸道輻射損傷機制，研發相關救治藥物具有重要的意義。

參考文獻:

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